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Bedienungsanleitung

A. Richtlinien für die Auswahl Elektropho-

rese Puffer und Gelkonzentrationen

Die zwei am häufigsten verwendeten Puffer für

die horizontale Elektrophorese der doppelsträn-

gigen DNA in Agarose-Gele sind Tris-Acetat-

EDTA-(TAE) und Tris-Borat-EDTA (TBE).

Während die Auflösungsvermögen dieser Puffer

sehr ähnlich sind, sind die relativen Pufferka-

pazitäten sehr unterschiedlich sind, verleihen

unterschiedliche Lauf-Attribute die im Folgenden

zusammengefasst:

TAE

Tris-Acetat ist traditionell die am häufigsten

gebrauchten Puffer. Allerdings wird seine relativ

geringe Pufferkapazität erschöpft bei längeren

Elektrophorese, was Puffer Rückführung notwendigen

Läufe in mehr als 140 mA-Stunden. Mögliche Vorteile

der Verwendung von TAE-Puffer über TBE-Puffer

sind hohe Auflösung der supercoiled DNA und etwa

10% schneller Migration von doppelsträngige lineare

DNA-Fragmente.

FSME

Tris-Borat ist signifikant größer Pufferkapazität und

ihrer relativ niedrigen Stromaufnahme eliminiert die

Notwendigkeit für die Rückführung in allen außer

den erweiterten Auflagen (> 300 mA-Stunden).

TBE-Puffer-Systeme sind nicht zu empfehlen, wenn

Fragmente aus dem Gel nach der Elektrophorese

gewonnen werden sollen.

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